人脐带血CD34^＋细胞的提取及慢病毒载体转染的初步研究

来源 :重庆医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：bokui0913

【摘要】

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目的探讨人脐带血CD34^＋细胞提取以及慢病毒转染的方法。方法脐带血20袋，采用直接梯度离心法，或6％羟乙基淀粉沉淀加梯度离心法收集单个核细胞，检测CD34^＋阳性率，经MACS磁珠分离获得C

【作者】

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李玉艳梁志清李彩霞潘静史常旭

【机构】

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第三军医大学西南医院妇产科,第三军医大学临床血液教研室

【出处】

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重庆医学

【发表日期】

：

2008年14期

【关键词】

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脐血CD34^+ 细胞慢病毒载体基因转染 human cord blood CD34 ^＋ cell lentivirus vector gene t

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目的探讨人脐带血CD34^＋细胞提取以及慢病毒转染的方法。方法脐带血20袋，采用直接梯度离心法，或6％羟乙基淀粉沉淀加梯度离心法收集单个核细胞，检测CD34^＋阳性率，经MACS磁珠分离获得CD34^＋细胞，分为完全培养基组、增强感染剂（ENis）组，过夜培养，每组按MOI 1：1、1：10、1：50加入带GFP标记的慢病毒载体进行转染，每小组再分组分别加入0、1、5ng／mL polybrene，转染后36～48h，3、5、7d分别在荧光显微镜下观察转染情况。结果直接梯度法获得的单个核细胞中红细胞含量高

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