【摘 要】
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目的：通过构建原核表达载体,获得肺炎链球菌毒力因子PspA重组蛋白。方法：分离培养肺炎链球菌TIGR4,获取其染色体DNA,采用基因体外重组法将PspA序列克隆到原核表达载体PET-32（a）上
【机 构】
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重庆医科大学医学检验系实验诊断教研室临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（30471873）.
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目的：通过构建原核表达载体,获得肺炎链球菌毒力因子PspA重组蛋白。方法：分离培养肺炎链球菌TIGR4,获取其染色体DNA,采用基因体外重组法将PspA序列克隆到原核表达载体PET-32（a）上,用酶切及测序鉴定。将重组质粒转化到大肠杆菌BL21（DE3）中,经IPTG诱导,进行蛋白纯化,获得的重组蛋白用SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果：克隆的DNA序列与GenBank中的数据相符,获得的重组蛋白PspA纯度达到90%。结论：成功表达和纯化了PspA,为肺炎链球菌多肽联合疫苗研制和该蛋
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