柱前衍生HPLC法分析榅桲多糖中单糖组成及PTP1B抑制活性

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目的建立柱前衍生反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定榅桲多糖中单糖的组成及摩尔比,检测榅桲多糖的蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B(PTP1B)抑制活性。方法采用水提醇沉法提取榅桲多糖,并用PTP1B体外模型进行抑制活性测定。榅桲多糖样品经三氟醋酸(TFA)(2 mo1.L-1)和硫酸(2 mo1.L-1)的混合溶液降解为单糖后,经1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化,利用RP-HPLC法,检测单糖的PMP衍生物。结果榅桲多糖中含有甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖等单糖,摩尔比为0.10∶0.72∶1.12∶4.23∶4.73。榅桲多糖具有良好的PTP1B抑制活性,其IC50为2.068μg.mL-1,初步推测榅桲多糖具有抗Ⅱ型糖尿病的潜力。结论该方法具有简便、快速、重现性好的特点,可用于榅桲多糖的单糖组成分析及质量控制。
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