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目的：探索成体大鼠的骨髓问充质干细胞(MSCs)的分离、体外培养方法，观察采用不同的换液频度与细胞增生和生长的关系，为其应用提供实验依据方法：从大鼠股骨获取骨髓，采用梯度离心的方法进行分离，在含10mL／L胎牛血清的DMEM中常规培养，以MTT法检测不同的时间换液时细胞的生长曲线，并用碱性磷酸酶(AKP)检测的方法对分离的细胞进行鉴定．结果：采用梯度离心方法分离的骨髓问质干细胞的纯度较高，细胞活性佳，AKP染色为强阴性．首次换液后，每天更换增养液比每隔3-4d换液一次更有利于MSCs的增生，原代长满培养瓶