【摘 要】
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运用多步PCR和测序技术,完成基因组中相距较远的单核苷酸多态位点的单倍型构建. 通过设计2条等位基因特异性引物,扩增大片段DNA (10 kb左右),以此大片段DNA作为下一轮PCR反应
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运用多步PCR和测序技术,完成基因组中相距较远的单核苷酸多态位点的单倍型构建. 通过设计2条等位基因特异性引物,扩增大片段DNA (10 kb左右),以此大片段DNA作为下一轮PCR反应的模板,再在该片段中设计待检测区域的PCR引物,进行第2轮PCR.对PCR产物进行测序分析,确定其多态位点处的等位基因.结合第1轮PCR中的等位基因特异性引物,即可确定该大片段DNA中不同单核苷酸多态性构成的单倍型.以脂蛋白脂酶基因为例,应用其启动子区以及第4外显子区的等位基因特异性引物扩增约16 kb的DNA片段,然后检
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