【摘 要】
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目的体外观察芒柄花素联合Akt抑制剂MK2206对不同分子亚型人乳腺癌MCF-7、BT-474、SK-BR-3和MDA-MB-231细胞株增殖和凋亡的影响。方法 MTT法检测芒柄花素单独或联合MK2206对4
【机 构】
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上海中医药大学附属龙华医院乳腺科,
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目的体外观察芒柄花素联合Akt抑制剂MK2206对不同分子亚型人乳腺癌MCF-7、BT-474、SK-BR-3和MDA-MB-231细胞株增殖和凋亡的影响。方法 MTT法检测芒柄花素单独或联合MK2206对4种不同分子亚型乳腺癌细胞增殖的抑制作用。流式细胞术分析单独用药及联合用药对乳腺癌细胞生长凋亡的影响。实时荧光定量PCR法检测实验组中凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达。蛋白质印迹法检测磷酸化Akt(phosphorate-Akt,p-Akt)和总Akt(total-Akt,t-Akt)蛋白表达。结果芒柄花素和MK2206均能抑制4种乳腺癌细胞的生长,呈剂量依赖性。选择80μmol/L芒柄花素和20nmol/L MK2206单独和联合处理4种细胞。联合用药后的抑制率高于单用药组,其中BT-474及MDA-MB-231细胞的联合用药组产生了协同作用,Q>1.15。两种药物均可诱导4种细胞凋亡,两药联用可使BT-474、SK-BR-3和MDA-MB-231细胞凋亡率显著增加,P<0.01。实时荧光定量PCR与蛋白质印迹法检测结果发现,单独用药能上调Bax及下调Bcl-2基因表达水平,并下调p-Akt蛋白表达水平,其中BT-474、SK-BR-3和MDA-MB-231细胞的联合用药组效果更显著,P<0.01。结论 MK2206联合芒柄花素可抑制4种不同亚型乳腺癌细胞的增殖,诱导凋亡,联合用药效果更显著,4种细胞效果有差异,其机制可能与抑制Akt磷酸化从而阻断PI3K/Akt信号转导途径有关。
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