【摘 要】
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目的建立高效特异的巴尔通体实时荧光定量PCR检测方法,并应用于实验用猫的微生物检测工作中。方法针对NCBI公布的巴尔通体序列设计特异引物和Taq Man探针,使用分子生物学方法
【机 构】
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中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所;
【基金项目】
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北京市科技计划(No.D171100002717001)
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目的建立高效特异的巴尔通体实时荧光定量PCR检测方法,并应用于实验用猫的微生物检测工作中。方法针对NCBI公布的巴尔通体序列设计特异引物和Taq Man探针,使用分子生物学方法制备质粒标准品,建立巴尔通体实时荧光定量PCR方法;对该方法的线性、敏感性、特异性及稳定性进行测定;并使用该方法对142个猫样品进行检测。结果成功建立巴尔通体实时荧光定量PCR方法;该方法线性范围为1.0×101copies/μL~1.0×109copies/μL,相关系数为0.998,检测极限达10 copies/μL;特异性结果显示所建方法具有良好的特异性,并在142份实验用猫样品中检测出阳性样品6份。结论实时荧光定量PCR方法可用于实验用猫巴尔通体的检测工作中。
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