【摘 要】
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目的 观察人参皂苷Rb1(GRb1)对体外培养大鼠雪旺细胞(SCs)增殖、细胞周期及增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响.方法 取3～5d无特定病原体(SPF)级SD大鼠20只,雌雄不限,体质量25～30
【机 构】
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430060,武汉大学人民医院骨一科湖北省阳新县人民医院骨二科;
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目的 观察人参皂苷Rb1(GRb1)对体外培养大鼠雪旺细胞(SCs)增殖、细胞周期及增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响.方法 取3～5d无特定病原体(SPF)级SD大鼠20只,雌雄不限,体质量25～30 g,分离双侧坐骨神经行SCs体外培养,培养细胞经S-100免疫荧光染色标记鉴定.取对数生长期SCs加入GRb1培养24 h,调整GRb1的终质量浓度为10 mg/L(B组)、20 mg/L(C组)、50 mg/L(D组)、100 mg/L(E组)、500 mg/L(F组),对照组(A组)加入等量磷酸盐缓冲液(PBS).细胞增殖检测法[细胞计数试剂盒(CCK-8)法]检测细胞增殖活性,碘化丙锭(PI)染色流式细胞仪检测细胞周期,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot法检测SCs内PCNA基因与蛋白的表达.结果 SCs经S-100免疫荧光标记染色提示阳性细胞率达90％以上,CCK-8检测结果显示GRb1在10～ 500 mg/L浓度范围内可以促进SCs增殖,流式细胞仪检测结果显示GRb1在10 ～500 mg/L浓度范围内可以促进SCs细胞周期进程,Real-time PCR及Western blot检测结果显示GRb1处理组SCs内PCNA基因和蛋白表达均高于对照组(P＜0.05).结论 GRb1可以促进SCs增殖及细胞周期进程,并促进SCs内PCNA表达.
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