随机单链DNA文库SELEX筛选寡核苷酸适配子方法的建立

来源 :生物化学与生物物理进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wlfzjut
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指数富集配基的系统进化(SELEX)技术是一种新的组合化学技术. 体外构建了一个长度为81 nt、含有35个随机序列的单链DNA(ssDNA)文库,优化了ssDNA文库扩增为双链DNA(dsDNA)文库的PCR反应条件.通过对比不对称PCR和生物素-链亲和素磁珠分离方法制备ssDNA文库的效果,确定了以生物素-链亲和素磁珠分离方法制备ssDNA.由于脱氧核糖核酸的疏水性导致ssDNA文库与硝酸纤维素滤膜的结合背景过高,因此选择以微孔板为介质,分离与靶蛋白结合的适配子. 经过9轮循环筛选,随机ssDNA文库
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