淫羊藿苷对高糖诱导H9c2心肌细胞凋亡的抑制作用

来源 :中国药理学与毒理学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jhiphop
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目的 研究淫羊藿苷(ICA)对高糖诱导大鼠心肌细胞H9c2凋亡的抑制作用及其机制。方法 H9c2细胞分为细胞对照组、高糖模型组、高糖+ICA 2.5,5.0,10.0,20.0和40.0μmol·L-1组,ICA培养1 h后更换含葡萄糖33 mmol·L-1的培养基培养3 d。CCK-8法检测H9c2细胞存活率,Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡率,生物化学法测定细胞培养基葡萄糖消耗量和乳酸水平,DCFH-DA荧光探针法测定细胞内活性氧(ROS)含量,Mito-Tracker Red CMXRos荧光探针法测定线粒体膜电位,Western印迹法检测动力素相关蛋白1(DRP1)、线粒体分裂蛋白1(FIS1)、线粒体融合蛋白2(MFN2)、视神经萎缩症蛋白1(OPA1)和活化胱天蛋白酶3/6/7蛋白表达水平。结果 与细胞对照组比较,高糖模型组H9c2细胞存活率、线粒体膜电位、MFN2和OPA1蛋白表达水平显著降低(P<0.01),细胞凋亡率、培养基葡萄糖消耗量和乳酸水平及细胞内ROS含量、DRP1、FIS1和活化胱天蛋白酶3/6/7蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与高糖模型组比较,高糖+ICA 5.0~20.0μmol·L-1组H9c2细胞存活率、培养基乳酸水平、MFN2和OPA1蛋白表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01),细胞凋亡率、DRP1、FIS1、活化胱天蛋白酶3/6/7蛋白表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01);与高糖模型组比较,高糖+ICA 20.0μmol·L-1组细胞内ROS含量显著降低(P<0.01),线粒体膜电位显著升高(P<0.01)。结论 ICA可能通过调节乳酸水平、协调线粒体融合分裂及稳定线粒体膜电位而抑制氧化应激和心肌细胞凋亡。
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