猪瘟病毒非结构蛋白NS2基因不同片段的克隆及在原核系统中的高效表达

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：Johnson_Gu

【摘要】

：

参照猪瘟病毒兔化弱毒疫苗株（HCLV）的基因组序列，设计并合成一组引物。从已构建含有猪瘟病毒兔化弱毒株全基因组质粒pMCfT1—6中分别扩增出NS2长1389bp和876bp的片段。将扩增的

【作者】

：

郭东春钱平李祥敏徐卓菲姚清侠金梅林陈焕春

【机构】

：

华中农业大学动物医学院动物病毒室

【出处】

：

中国预防兽医学报

【发表日期】

：

2006年1期

【关键词】

：

猪瘟病毒 NS2基因表达 classical swine fever virus NS2 expression

【基金项目】

：

湖北省科技攻关（2004AA202801）

下载到本地 , 更方便阅读

下载此文赞助VIP

声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架

论文部分内容阅读

参照猪瘟病毒兔化弱毒疫苗株（HCLV）的基因组序列，设计并合成一组引物。从已构建含有猪瘟病毒兔化弱毒株全基因组质粒pMCfT1—6中分别扩增出NS2长1389bp和876bp的片段。将扩增的不同长度的NS2基因序列克隆至表达载体pGEX—KG中，经酶切鉴定后，转化大肠杆菌BL21（DE3），于37℃，1．0mmol／L IPTG条件下诱导表达。大肠杆菌菌体裂解产物经SDS—PAGE分析，在分子量约为40ku处出现和预期的目的蛋白分子量相符的条带。Western—blotting检测表明，表达产物能与猪瘟病

其他文献

致初生仔猪腹泻大肠埃希氏菌氨基糖苷类耐药性检测及AAC（3）-Ⅱ基因序列分析

从1995年至2006年分离鉴定的菌株中选取173株致初生仔猪腹泻大肠杆菌，进行氨基糖苷类药物的药敏试验；根据耐氨基糖苷类药物主要钝化酶-氨基糖苷乙酰转移酶（aminoglycosideace ty

期刊

大肠杆菌耐药性乙酰转移酶(AAC)aac(3)-ⅡE.coli resistance aminoglycoside acetyltransferas

两株狂犬病病毒强毒株糖蛋白基因的克隆及潜在抗原表位分析

通过RT-PCR分别获得了狂犬病病毒强毒CVS株、DRV82株糖蛋白基因，进行克隆及测序，并推导出氨基酸序列，与犬用疫苗弱毒株ERA、SRV9、犬源性街毒株CGX及人用疫苗株PG的糖蛋白序列进

期刊

狂犬病病毒糖蛋白抗原位点rabies virus glycoprotein： antigenic siles

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒RT—PCR鉴别诊断方法的建立

2006年5月以来，我国部分猪场暴发了一种以高热、高发病率和高死亡率为特征的传染性疾病，经病原分离及分子流行病学分析证明是由一种带有nsp2部分缺失的、对猪呈高致病性的猪繁

期刊

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒基因缺失RT-PCR鉴别诊断highly pathogenic PRRSV gene deletion RT-PCR

胸膜肺炎放线杆菌ApxlA毒素蛋白免疫原性分析

为鉴定胸膜肺炎放线杆菌（Actinobacillus pleuropneumoniae，APP）ApxIA毒素蛋白N端疏水区和C端Ca^2＋结合区的免疫原性，参照apxIA基因序列（D16582）设计4条引物，用于扩增APP血清10型参考

期刊

胸膜肺炎放线杆菌ApxIA毒素原核表达免疫原性Actinobacillus pleuropneumoniae ApxIA toxin prokary

一株野鸭源新城疫病毒F基因的克隆及序列分析

根据GenBank中新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）的F基因序列设计了1对特异性引物，成功地对其中一株野鸭源NDV的F基因进行了克隆、测序，并推导其氨基酸序列，选择F基因部分片

期刊

野鸭源新城疫病毒F基因克隆及序列分析Newcastle disease virus wild ducks F gene cloning and se

猪流感病毒H1N1、H1N2和H3N2亚型多重RT—PCR诊断方法的建立

对我国分离到的猪流感病毒和GenBank数据库中已有的猪流感病毒H1N1、H1N2和H3N2亚型毒株的HA、NA基因核苷酸序列进行分析,分别选出各个病毒亚型HA和NA基因中高度保守且特异的

期刊

猪流感病毒H1N1H1N2H3N2多重RT-PCR

不同佐剂和免疫途径对柔嫩艾美耳球虫SO7抗原免疫保护效果的影响

利用PGEX-6P-1融合表达系统将SO7基因在大肠杆菌中进行融合表达，对表达产物进行初步纯化和复性，制备免疫原。分别使用不同剂量的人参总皂甙和重组γ-干扰素以及弗氏完全佐剂作

期刊

柔嫩艾美耳球虫SO7抗原佐剂免疫途径保护效果recombinant SO7 antigen of Eimeria tenella adjuvant

基因免疫制备牛分枝杆菌MPB64抗原单克隆抗体

为了建立针对牛分枝杆菌分泌抗原MPB64的检测手段，制备该抗原的单克隆抗体，构建真核表达载体pcDNA-mpb64，以原核表达并纯化的融合蛋白H-MPB64包被ELISA板，建立单克隆抗体检测方法

期刊

牛分枝杆菌MPB64蛋白基因免疫单克隆抗体Mycobacterium boris gene immunization McAb

间接ELISA检测牛分枝杆菌抗体方法的建立及初步应用

针对现行牛结核病检疫方法结核菌素皮内变态反应（TST）的不足,本研究选用牛分枝杆菌特异性抗原MPB83、MPB70及CFP10与ESAT-6融合蛋白（CFP10-ESAT-6）分别建立了检测牛分枝杆菌特异

期刊

牛分枝杆菌ELISACFP10-ESAT-6MPB83MPB70结核检疫Mycobacterium bovis enzyme-linked im

苏太仔猪FUT1基因M307位点多态性与F18大肠杆菌抗病相关性的体外鉴定

采用PCR-RFLP方法检测了江苏苏太断奶仔猪FUT1基因M307位点等位基因多态性分布，在所检的49头仔猪中，GG基因型个体16头，AG基因型19头，从基因型14头。在此基础上，制备上述不同基因型

期刊

仔猪F18大肠杆菌受体FUT1基因基因多态性piglet Escherichia coliF18 receptor FUT1 gene pol

猪瘟病毒非结构蛋白NS2基因不同片段的克隆及在原核系统中的高效表达

与本文相关的学术论文