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为了能快速准确地对猪脑心肌炎进行病原学检测，根据GenBank中发表的猪脑心肌炎病毒(EMCV)3D基因序列，设计合成了1对特异性引物，建立了EMCV的一步法RT-PCR检测方法。通过对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验，结果显示，该方法从EMCV BJC3株中扩增出了与试验设计相符的286 bp的特异性片段，而对猪口蹄疫病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、BHK-21正常细胞的扩增结果均为阴性：对EMCV BJC3株的细胞毒进行检测，其敏感度达到2 TCID50;对10份EMCV BJC3株细胞毒进行重复性检测，结果均一致。应用该方法对207份临床疑似发病猪样品进行检测，结果检出19份阳性，阳性检出率为9.18％。
结果表明，所建立的EMCV-步法RT-PCR检测方法特异、灵敏、高效、快速，可用于EMCV的临床检测及流行病学调查。