目的:建立液相色谱-串联质谱法测定犬血浆中丁苯酞的浓度。方法:6只Beagle犬,单剂量灌胃丁苯酞(20 mg·kg^-1),犬血浆样本以乙腈沉淀蛋白后,选用Agilent Poroshell 120 EC-C₁₈色谱柱（2.1 mm×50 mm,2.7μm）,流动相为水-乙腈（65∶35）,流速0.4 mL·min^-1,柱温40℃,进样量5μL,分析时间4.5 min;选用Agilent 6460三重四极杆串联质谱仪,离子化方式:电喷雾-正离子（API-ES）,干燥气为N₂,干燥气流速11 L·min^-1,干燥气压力0.31 MPa,干燥气温度350℃,毛细管电压4kV。监测方式为MRM,丁苯酞监测离子对m/z 191.0/144.9,地西泮监测离子对m/z 285.1/193.1。结果:本分析方法专属性良好;丁苯酞质量浓度在2～2 000 ng·mL^-1范围内线性关系符合要求;准确度均在85%～115%,精密度RSD在15%内。主要药代动学参数:T_max为（0.52±0.09）h,C_max为（1 625±273）μg·L^-1,AUC_{0-24 h}为（5 076±751）μg·L^-1·h^-1,t_1/2为（1.26±0.11）h。结论:本法适用于犬血浆中丁苯酞浓度的测定,可用于丁苯酞犬体内药代动力学研究。