利用外源基因侧翼序列扩增筛选番茄纯合转基因植株

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:julian
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传统的纯化外源基因的方法主要是通过多代自交,该方法耗时长,效率低。对转基因材料中外源基因T-DNA区域插入位点两翼序列的分析和扩增,是在转基因后代中筛选纯合转基因植株的新方法。首先,利用酶切连接接头的PCR方法,在番茄(Lycopersicon esculentum)转基因植株中扩增外源基因Avr3a的两翼序列并测序;然后通过该序列设计的引物在转基因植株中验证,得到的两翼序列通过与SGN数据库比对分析,结果发现,外源基因的插入位点有40bp的碱基缺失;最后利用侧翼序列和边界序列设计的引物,在转基因T1代植
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