人胰腺激肽释放酶cDNA的克隆、序列分析和原核表达

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tzhole

【摘要】

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为了研制人激肽释放酶(KLK1)特异单克隆抗体和进行重组酶的鉴定及纯化,根据已发表的人KLK1序列设计引物,用PCR扩增法从人胰腺单链cDNA库中特异地扩增出KLK1 cDNA.将其克隆入p

【作者】

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施伟庆张磊孙怀昌

【机构】

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扬州大学江苏省转基因动物制药工程研究中心

【出处】

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农业生物技术学报

【发表日期】

：

2003年2期

【关键词】

：

人胰腺激肽释放酶 CDNA 克隆序列分析原核表达 human kallikrein cDNA sequence anlysis prokaryotic ex

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为了研制人激肽释放酶(KLK1)特异单克隆抗体和进行重组酶的鉴定及纯化,根据已发表的人KLK1序列设计引物,用PCR扩增法从人胰腺单链cDNA库中特异地扩增出KLK1 cDNA.将其克隆入pGEM-T载体中,对5个重组质粒进行了序列测定,其中1个cDNA克隆的核苷酸序列与已发表的人肾/胰/唾液腺KLK1 cDNAs序列完全相同或有3个核苷酸差异.将去除信号肽序列的KLK1 cDNA以正确阅读框插入表达载体pGEX-4T-3,构建成重组质粒pGEX-KLK1.此重组质粒转化的E.coli经IPTG诱导后表达

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