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为建立一种可同时检测牛支原体（MB）、牛病毒性腹泻病毒（BVDV）和牛传染性支气管炎病毒（IBRV）的三重二温式PCR检测方法。根据GenBank中MB、BVDV和IBRV的保守基因Uvrc基因、5’端非编码区（5TUTR）和GB基因，分别设计了3对特异引物，将三温式PCR扩增程序简化为两个温度梯度，优化反应条件建立了用于同时检测MB、BVDV以及IBRV3种常见牛呼吸道传染病病原的三重二温式PCR。结果显示，该方法特异性好，只对MB、BVDV和IBRV模板进行扩增，扩增的目的片段长度分别为412、170