【摘 要】
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目的构建并高效表达抗胶质瘤单链抗体(ScFv),为基因工程双功能抗体的制备及进一步用于脑肿瘤的诊治奠定基础.方法以重、轻链可变区基因构建ScFv基因,并克隆入表达载体pGEX-5X
【机 构】
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苏州医学院附属第二医院神经外科江苏苏州 215004
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目的构建并高效表达抗胶质瘤单链抗体(ScFv),为基因工程双功能抗体的制备及进一步用于脑肿瘤的诊治奠定基础.方法以重、轻链可变区基因构建ScFv基因,并克隆入表达载体pGEX-5X-1,在大肠杆菌BL21 DE3中诱导表达,以SDS-PAGE及Western blot检测表达产物.结果以限制性内切酶酶切及DNA测序证实,基因构建正确,表达产物的相对分子质量(Mr)为52 000,与理论值相符,表达量占菌体总蛋白的42%.结论实现了胶质瘤ScFv的高效表达,为胶质瘤的导向诊治提供了新的治疗选择.
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