【摘 要】
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成功地构建了甘薯谷胱甘肽-S-转移酶基因IBGSTU1的原核表达质粒pET-IbGST,并在大肠杆菌BL2I(DE3)中进行IPTG诱导表达.重组蛋白部分以包涵体形式存在,部分以可溶性蛋白形式存
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成功地构建了甘薯谷胱甘肽-S-转移酶基因IBGSTU1的原核表达质粒pET-IbGST,并在大肠杆菌BL2I(DE3)中进行IPTG诱导表达.重组蛋白部分以包涵体形式存在,部分以可溶性蛋白形式存在.酶活性测定表明可溶的重组蛋白具有GST的活性.纯化的重组蛋白质用于多克隆抗体的制备.半定量RT-PCR和Western blotting分析结果显示,在正常的生长条件下,甘薯组织不启动IBGSTU1基因的转录和翻译,但是在冷胁迫或重金属离子等的作用下,可以检测到该基因的mRNA和编码的蛋白质,表明该基因在甘薯的胁迫耐受中行使重要功能,并发现该基因的表达具有组织特异性.
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