【摘 要】
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目的 探讨中脑星形胶质细胞源性神经营养因子(MANF)对脊髓A2型反应性星形胶质细胞(RAS)增殖及凋亡的影响.方法 取SD大鼠脊髓组织进行星形胶质细胞的分离及培养,并采用免疫荧光技术鉴定细胞.采用白细胞介素-1β(IL-1β)刺激星形胶质细胞制备A2型RAS,作为实验组,并用未处理组做空白对照组.然后采用免疫荧光染色法对制备的A2型RAS进行鉴定.将制备完成的细胞分成Control组和MANF组,以不同浓度(0、0.5、1、2μg/ml)的MANF蛋白及不同的作用时间(12、24、36、48h)处理细胞
【机 构】
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安徽医科大学第一附属医院关节外科,合肥230022
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目的 探讨中脑星形胶质细胞源性神经营养因子(MANF)对脊髓A2型反应性星形胶质细胞(RAS)增殖及凋亡的影响.方法 取SD大鼠脊髓组织进行星形胶质细胞的分离及培养,并采用免疫荧光技术鉴定细胞.采用白细胞介素-1β(IL-1β)刺激星形胶质细胞制备A2型RAS,作为实验组,并用未处理组做空白对照组.然后采用免疫荧光染色法对制备的A2型RAS进行鉴定.将制备完成的细胞分成Control组和MANF组,以不同浓度(0、0.5、1、2μg/ml)的MANF蛋白及不同的作用时间(12、24、36、48h)处理细胞,采用CCK-8法检测在450 nm处的吸光度.取一定浓度的MANF蛋白(1μg/ml)处理细胞,同样分为Control组和MANF组,采用EdU法验证对A2型RAS增殖能力的影响.采用TUNEL法验证对A2型RAS凋亡的影响.结果 免疫荧光结果显示IL-1β可以刺激星形胶质细胞向A2型转化;CCK-8、EdU增殖实验结果显示,MANF蛋白干预后,细胞增殖能力均显著高于对照组(P＜0.05);TUNEL凋亡实验显示经MANF蛋白干预后,凋亡细胞明显减少(P＜0.05).结论 MANF蛋白对A2型RAS具有促进增殖、抑制凋亡的作用.
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