结核杆菌热休克蛋白—65重组质粒的构建及其在真核细胞中的初步表达

来源 :现代临床医学生物工程学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：fantong518

【摘要】

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目的构建结核杆菌热休克蛋白-65(HSP65)真核表达质粒,并探讨其在人肺癌细胞系A549中的表达. 方法用PCR的方法从结核杆菌H37Rv基因组中扩增出HSP65基因,并定向克隆到真核表达

【作者】

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梁增伟李用国任红

【机构】

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广州医学院第一附属医院感染科,重庆医科大学病毒性肝炎研究所

【出处】

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现代临床医学生物工程学杂志

【发表日期】

：

2001年6期

【关键词】

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热休克蛋白-65 结核杆菌构建真核表达 Heat shock protein 65Mycobacterium tuberculosisConstructEu

【基金项目】

：

国家自然科学基金

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目的构建结核杆菌热休克蛋白-65(HSP65)真核表达质粒,并探讨其在人肺癌细胞系A549中的表达. 方法用PCR的方法从结核杆菌H37Rv基因组中扩增出HSP65基因,并定向克隆到真核表达质粒pcDNA3.1(+),构建成重组质粒pcDNA3.1-HSP65;然后用电穿孔的方法将质粒pcDNA3.1-HSP65转染到A549 细胞,经G418筛选后获得抗性细胞克隆;用RT-PCR的方法检抗性细胞中HSP65 mRNA的表达 . 结果经酶切鉴定和DNA序列测定证实重组质粒pcDNA3.1-HSP65构建正

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