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人角膜内皮细胞(HCECs)位于角膜内侧,增殖能力有限,损伤后容易失去代偿功能,发生内皮盲.目前,角膜移植是治疗该疾病的唯一有效的方法,但供体短缺等因素制约了角膜移植术的应用.因此,使用组织工程角膜作为传统角膜供体的替代物已迫在眉睫.本文回顾了近年来国内外相关研究成果,阐述了为克服接触性抑制和内皮-间质转化(EMT)的问题,学者们对HCECs的分离和体外培养方法进行改进,并总结了从形态学,关键标志物以及基因水平来鉴定HCECs的方法,为HCECs组织工程角膜内皮植片的进一步研究提供参考.