实时定量PCR评价小鼠胸腺功能方法的建立

来源 :南方医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wangrong2000

【摘要】

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目的建立实时定量PCR检测小鼠胸腺及脾脏T淋巴细胞中信号结合T细胞受体删除环（sjTRECs）水平的方法。推测其中的初始T细胞的数目，评价胸腺功能，从而为胸腺功能研究及胸腺研究模型

【作者】

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张华华曾耀英何贤辉刑飞跃

【机构】

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暨南大学组织移植与免疫实验中心

【出处】

：

南方医科大学学报

【发表日期】

：

2006年1期

【关键词】

：

实时定量PCR T细胞受体删除环幼稚T细胞

【基金项目】

：

国家重点基础研究发展规划项目(G1999054303,G2000057006);国家自然科学基金重点项目(30230350,39930230);广东省“十五”重大科技专项(A302020204)

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目的建立实时定量PCR检测小鼠胸腺及脾脏T淋巴细胞中信号结合T细胞受体删除环（sjTRECs）水平的方法。推测其中的初始T细胞的数目，评价胸腺功能，从而为胸腺功能研究及胸腺研究模型的建立提供研究依据和方法。方法提取小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞基因组DNA，PCR扩增目的片段。纯化构建标准质粒的RAG2片段，构建标准重组质粒并鉴定。优化PCR体系后，实时定量PCR反应建立标准曲线，并检测不同品系（BALB／c和C57BL／6）成年小鼠胸腺及脾脏淋巴细胞sjTRECs含量。结果成功构建标准质粒。确定最适实时定量PC

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