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羟氨氧化酶（Hydroxylamine oxidase，HAO）的作用方式直接决定了异养硝化好氧反硝化细菌的代谢途径，分离得到纯度较高的HAO也就成为研究这类细菌脱氮机制的重要环节。以异养硝化好氧反硝化细菌Agrobacterium tumefaciens LAD9为代表，建立了该菌株HAO的分离纯化方法：首先采用渗透压休克法提取细胞周质液，然后采用DEAE Sepharose CL-6B离子交换层析和Sephacryl S-100凝胶过滤层析对细胞周质液进行分离纯化。结果表明，经过离子交换层析可得到分子