水中大肠菌群微滴数字PCR定量检测方法的建立

来源 :环境保护科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wxj3177

【摘要】

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以大肠菌群的lacZ基因为靶基因,建立一种快速、稳定、灵敏、特异的微滴数字聚合酶链式反应(Droplet Digital Polymerase Chain Reaction,ddPCR)定量检测方法。对ddPCR反应体

【作者】

：

马薇孔义军吴伟健刘桂环

【机构】

：

澳门自来水股份有限公司,生态环境部环境规划院

【出处】

：

环境保护科学

【发表日期】

：

2019年1期

【关键词】

：

大肠菌群微滴数字PCR 定量检测

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以大肠菌群的lacZ基因为靶基因,建立一种快速、稳定、灵敏、特异的微滴数字聚合酶链式反应(Droplet Digital Polymerase Chain Reaction,ddPCR)定量检测方法。对ddPCR反应体系中试剂浓度、退火温度等条件优化筛选的同时,考察了方法的线性范围、精密度和定量限。最终确定反应体系中的最佳引物和探针浓度分别为0.2和0.5μmol/L,最佳退火温度为56℃。大肠菌群lacZ基因组DNA浓度范围为3.95~7.80×10^4拷贝(copies)/20μL ddPC

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