【摘 要】
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目的探讨T4DNA连接酶影响电转化效率的机制并寻找提高电转化效率的方法。方法将1μg噬粒pDAN5加入到连接反应体系中并进行沉淀、热灭活以及酚氯仿抽提等各种处理后进行电转化
【机 构】
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第四军医大学西京医院泌尿外科,第四军医大学西京医院肝胆外科,第四军医大学基础部免疫学教研室
【基金项目】
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陕西省自然科学基础研究计划面上项目(No:2009JM4003-2)
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目的探讨T4DNA连接酶影响电转化效率的机制并寻找提高电转化效率的方法。方法将1μg噬粒pDAN5加入到连接反应体系中并进行沉淀、热灭活以及酚氯仿抽提等各种处理后进行电转化。结果热灭活、酚氯仿抽提、热灭活后沉淀及热灭活后酚氯仿抽提处理后的转化效率最高（4．6x108^8-5．3×10^8），其次是沉淀处理（4．8×107），未处理的转化效率最低（4．4×10s）。结论T4DNA连接酶的活性是导致电转化效率降低的主要原因，任何可以灭活该酶活性的方法均可显著地提高转化效率。
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