目的:建立柱前衍生反向高效液相色谱荧光检测法同时对肝癌相关L-酪氨酸(L-tyrosine,L-Tyr)、D-酪氨酸(D-tyrosine,D-Tyr)、L-缬氨酸(L-valine,L-Val)、D-缬氨酸(D-valine,D-Val)进行拆分测定。比较正常人与原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)(以下简称原发性肝癌)患者血浆中酪氨酸与缬氨酸对映体含量的变化,考察它们与原发性肝癌的关系。方法:柱前衍生化试剂:邻苯二甲醛(O-phthaldialdehyde,OPA)和N-乙酰-L-半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC);色谱柱:菲罗门Gemini C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:20.0 mmol/L磷酸二氢钠(p H 6.8)-乙腈为流动相的梯度洗脱;荧光检测波长设定:激发波长(λex)为350 nm,发射波长(λem)为450 nm;流速1 ml/min;柱温30℃;进样量10μl。结果:4种物质的回收率在90.74%~106.80%之间,线性关系良好,检出限分别为6.79 pg/ml(L-Tyr),7.81 pg/ml(D-Tyr),1.86 pg/ml(L-Val),1.95 pg/ml(D-Val)。利用该方法,对20名健康志愿者和23名HCC患者的血浆进行测定,统计分析结果表明,L-Tyr明显升高(P=0.011),L-Val(P=0.019)、D-Val(P=0.006)显著性降低,D-Tyr(P=0.973)无明显变化。结论:该方法准确、灵敏、重复性好,适用于实验室研究与临床检测。