【摘 要】
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目的 研究牛膝甾酮(IS)对小鼠成骨细胞系(MC3T3-E1细胞)增殖、分化的影响及其可能的分子机制.方法 将MC3T3-E1细胞分为对照组及IS不同浓度组(10-4～10-1 ng/μL),24、48 h后采
【机 构】
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广州中医药大学第三临床医学院 广州510405;广东省第二中医院针灸科 广州510095
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目的 研究牛膝甾酮(IS)对小鼠成骨细胞系(MC3T3-E1细胞)增殖、分化的影响及其可能的分子机制.方法 将MC3T3-E1细胞分为对照组及IS不同浓度组(10-4～10-1 ng/μL),24、48 h后采用细胞计数(CCK8)试剂盒检测细胞增殖,7、14天后采用碱性磷酸酶(ALP)活性试剂盒检测ALP活性,茜素红染色检测矿化结节,原位末端标记(TUNEL)试剂盒检测细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测成骨分化相关标志物Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ)、骨保护素(OPG)、骨桥蛋白(OPN)、骨钙素(OCN)、ALP以及雌激素受体alpha(ERα)、雌激素受体beta(ERβ) mRNA的表达水平.结果 与对照组比较,在干预48 h后,10-3、10-2、10-1 ng/μL IS能抑制细胞的增殖(P＜0.05),但对细胞凋亡无明显影响.10-4、10-3、10-2、10-1 ng/μL IS均能够促进ALP活性及矿化结节的形成(P＜0.05),亦能促进ERα、OPG、Collagen Ⅰ、ALP mRNA表达(P＜0.05);10-3、10-2、10-1 ng/μL IS均能促进OPN、OCN mRNA表达(P＜0.05),10-1ng/μL IS能够促进ERp mRNA表达(P＜0.05).结论 IS能促进MC3T3-E1细胞的成骨分化,其可能机制与上调成骨分化标志物及提高ERα mRNA表达有关.
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