【摘 要】
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目的 探讨不同体外转染条件对酸敏感阳离子聚合物基因载体bPOEAA包裹的荧光素酶质粒pGL3复合物转染效率的影响.方法 获得最佳转染效率后,利用bPOEAA包裹绿色荧光蛋白质粒pEGF
【机 构】
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江南大学药学院,江苏无锡,214122
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目的 探讨不同体外转染条件对酸敏感阳离子聚合物基因载体bPOEAA包裹的荧光素酶质粒pGL3复合物转染效率的影响.方法 获得最佳转染效率后,利用bPOEAA包裹绿色荧光蛋白质粒pEGFP-N1,转染非洲绿猴肾成纤维细胞COS-7和小鼠成纤维细胞NIH3T3,利用荧光显微镜和流式细胞术考察转染效率.结果 最佳转染条件确定为:COS-7细胞在pH值为7.4、复合物中所含DNA量为5μg、bPOEAA/pGL3质量比为24转染时使用含有10％血清的DMEM培养基.优化后荧光素酶质粒表达量为优化前的31倍,细胞转染效率达38.6％.结论 培养基pH值、DNA量、bPOEAA/pGL3质量比、血清含量对复合物转染效率均有显著影响.
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