miRNA-30a／30e腺病毒表达载体的构建

来源 :南方医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ningyuanhui

【摘要】

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目的构建稳定表达成熟miRNA-30a和miRNA-30e腺病毒表达载体。方法小鼠基因组中分别扩增出带有酶切位点的mlTIU-miR-30a、mlnu-miR-30e目的基因，目的基因连接到穿梭质粒pSES-HU

【作者】

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刘强顾金金罗敏施琼

【机构】

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江苏大学附属医院检验科//镇江市免疫学重点实验室,镇江市第一人民医院老年科,重庆医科大学医学检验学院

【出处】

：

南方医科大学学报

【发表日期】

：

2013年2期

【关键词】

：

miRNA-30a miRNA-30e AdEasy系统荧光定量PCR miRNA-30a miRNA-30e AdEasy system fluore

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目的构建稳定表达成熟miRNA-30a和miRNA-30e腺病毒表达载体。方法小鼠基因组中分别扩增出带有酶切位点的mlTIU-miR-30a、mlnu-miR-30e目的基因，目的基因连接到穿梭质粒pSES-HUS，带有目的基因的穿梭质粒重组到骨架质粒AdEasyl上，重组质粒转染到Hek．293细胞中包装成腺病毒载体，反复扩增之后获得高滴度的pAd-mlnu-miR，30a、pAd-mlnu-miR-30e腺病毒。用目的腺病毒分3组（RFP对照组，miR-30a组，miR-30e组）感染小鼠Mefs细胞

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