【摘 要】
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胞红蛋白是脊椎动物珠蛋白超家族的一员,具有重要的生物学功能,已在大肠杆菌中成功表达.酵母表达系统作为常用的真核表达系统,具有外源蛋白表达蛋白量大且活性高等优点.该研
【机 构】
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中国药科大学生命科学与技术学院,江苏南京,210009
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胞红蛋白是脊椎动物珠蛋白超家族的一员,具有重要的生物学功能,已在大肠杆菌中成功表达.酵母表达系统作为常用的真核表达系统,具有外源蛋白表达蛋白量大且活性高等优点.该研究通过PCR扩增技术获得胞红蛋白编码基因并通过DNA重组技术构建并鉴定了胞红蛋白毕赤酵母分泌型表达载体CYGBpGAPZαA.将重组载体经单酶切线性化后通过电转化法转入毕赤酵母GS115,利用梯度浓度的Zeocin抗生素和PCR技术筛选得到阳性转化子.工程菌经发酵培养后,发酵上清液经镍柱分离得到较高纯度的目的蛋白,并经电泳等方法验证鉴定.
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