【摘 要】
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目的 研究PI3K和Notch信号途径在寻常型银屑病患者外周静脉血CD4+ T细胞增殖、活化中的影响。方法 采集28例寻常型银屑病患者和28例健康对照外周静脉血，采用免疫磁珠法分选外周血CD4+ T细胞。将寻常型银屑病患者外周血CD4+ T细胞分为4组：空白对照组，10μmol/L PI3K阻滞剂组（LY294002组）,25μmol/L Notch阻滞剂组（DAPT组）,10μmol/L LY2
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目的 研究PI3K和Notch信号途径在寻常型银屑病患者外周静脉血CD4+ T细胞增殖、活化中的影响。方法 采集28例寻常型银屑病患者和28例健康对照外周静脉血，采用免疫磁珠法分选外周血CD4+ T细胞。将寻常型银屑病患者外周血CD4+ T细胞分为4组：空白对照组，10μmol/L PI3K阻滞剂组（LY294002组）,25μmol/L Notch阻滞剂组（DAPT组）,10μmol/L LY294002+25μmol/L DAPT组（LY294002+DAPT组）。均分别用植物血凝素（PHA）10μg/mL和IL-2 1 000 U/mL刺激增殖6 h,采用FCM检测CD4+ T细胞内的CyclinA、Cyclin D1及P27kipl细胞周期蛋白水平，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测Cyclin A、Cyclin D1及P27kipl mRNA水平，并对数据进行统计学处理。结果 CD4+ T细胞经免疫磁珠法分选后纯度为（90.00±3.90）%,CD4+ T细胞培养存活百分率达（92.50±4.60）%。寻常型银屑病患者外周血CD4+ T细胞Cyclin A、Cyclin D1水平分别为（27.60±3.80）%、（14.70±3.20）%,mRNA水平分别为0.56±0.14、1.37±0.39,与健康对照组（13.50±3.70）%、（7.80±2.00）%和（0.31±0.12）、（0.93±0.35）比较均明显升高，差异有统计学意义（P分别为0.002、0.037和0.008、0.043）。寻常型银屑病患者外周血CD4+ T细胞P27kipl蛋白和mRNA分别为（23.50±3.60）%和（0.17±0.02）,均低于健康对照组的（36.80±5.60）%和（0.33±0.05）,差异有统计学意义（P分别为0.007、0.001）。与空白对照组CD4+ T细胞Cyclin D1蛋白和mRNA表达[分别为（12.30±3.50）%和（1.74±0.39）]比较，LY294002组、DAPT组、LY294002+DAPT组表达均下降，分别为（7.20±3.10）%、（8.20±2.50）%、（4.30±1.50）%和（1.11±0.29）、（1.26±0.28）、（0.63±0.20）,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。与空白对照组CD4+ T细胞P27kipl蛋白[（21.80±3.20）%]比较，LY294002组、DAPT组、LY294002+DAPT组蛋白水平均升高，分别为（30.90±5.10）%、（27.60±5.20）%、（43.90±3.00）%,差异均有统计学意义（P分别为0.005、0.006、0.001）;与空白对照组CD4+ T细胞P27kipl mRNA（0.15±0.08）比较，LY294002组、DAPT组、LY294002+DAPT组水平均上升，分别为（0.37±0.07）、（0.62±0.09）、（0.99±0.21）,差异均有统计学意义（P分别为0.018、0.002、0.003）。空白对照组、LY294002组、DAPT组、LY294002+DAPT组组间CD4+ T细胞Cyclin A蛋白和mRNA表达无显著性差异（均P＞0.05）。结论 PI3K与Notch信号途径可协同增强CD4+ T细胞内正向调节蛋白Cyclin D1水平升高及负向调节蛋白P27kipl水平下降，提示PI3K和Notch信号途径对寻常型银屑病患者外周血CD4+ T细胞的增殖、活化起着协同调控作用。
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