【摘 要】
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目的 在巨噬细胞中确定四逆散中具有Ⅰ型干扰素（IFN-Ⅰ）调控作用的中药，并探究其具体作用靶点及主要作用成分。方法 通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测四逆散组方药材柴胡、枳实、白芍、甘草水提物对IFN-Ⅰ通路相关基因表达的影响；通过CCK-8法检测甘草水提物对巨噬细胞RAW264.7细胞活力的影响；qRT-PCR法检测甘草水提物对IFNα2诱导的干扰素诱导基因（ISGs） mRNA表
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（82004029）； 北京市科技新星项目（Z201100006820025,Z211100002121167）；
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目的 在巨噬细胞中确定四逆散中具有Ⅰ型干扰素（IFN-Ⅰ）调控作用的中药，并探究其具体作用靶点及主要作用成分。方法 通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测四逆散组方药材柴胡、枳实、白芍、甘草水提物对IFN-Ⅰ通路相关基因表达的影响；通过CCK-8法检测甘草水提物对巨噬细胞RAW264.7细胞活力的影响；qRT-PCR法检测甘草水提物对IFNα2诱导的干扰素诱导基因（ISGs） mRNA表达水平的影响；蛋白免疫印迹（Western blotting）法检测甘草水提物对IFNα2诱导的JAK1、TYK2、STAT1、STAT2蛋白磷酸化水平的影响；qRT-PCR法检测甘草水提物中单体成分甘草酸、甘草苷、异甘草素、甘草素、18β甘草次酸对IFNα2诱导的ISGs的mRNA表达水平的影响。结果 四逆散组方药材柴胡、枳实、白芍各水提物对IFNα2诱导的Isg15和Ifit1表达水平无显著影响，而甘草水提物显著增加了IFNα2诱导的Isg15和Ifit1的基因表达水平（P＜0.01、0.001）；甘草水提物显著增加了IFNα2诱导的JAK1、TYK2、STAT1、STAT2蛋白磷酸化（P＜0.05、0.01、0.001）；甘草水提物中18β-甘草次酸能够显著增强IFNα2诱导的Isg15和Ifit1的mRNA表达（P＜0.001）。结论甘草水提物能够显著激活JAK-STAT信号通路并诱导IFN-Ⅰ下游ISGs的表达，具有较强的固有免疫激活作用。18β-甘草次酸可能是甘草水提物发挥激活IFN-Ⅰ通路的主要有效成分之一。
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