【摘 要】
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目的克隆单核细胞增生症李斯特菌细胞溶解素O（LLO）基因hlyA,构建其原核表达系统,鉴定融合蛋白LLO的抗原性和溶血活性.方法采用PCR技术从Lm总DNA中扩增hlyA基因,与基因库中其它9
【机 构】
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中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所
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目的克隆单核细胞增生症李斯特菌细胞溶解素O（LLO）基因hlyA,构建其原核表达系统,鉴定融合蛋白LLO的抗原性和溶血活性.方法采用PCR技术从Lm总DNA中扩增hlyA基因,与基因库中其它9株hlyA基因序列相比较.用pET30a载体构建LLO原核表达质粒pET30a-hlyA,在E.coli BL21（DE3）宿主菌中用IPTG诱导表达,Ni2＋柱纯化后,Western blot鉴定其抗原性.用人红细胞检测溶血活性.结果所克隆的hlyA基因PEST样结构与GenBank上9个菌株的相应氨基酸序列相比,
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