基于PEDV ORF3基因的强弱毒株鉴别方法的建立及初步应用

来源 :动物医学进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xstyx

【摘要】

：

为了建立一种快速鉴别PEDV强毒株和弱毒株的RT-PCR方法,针对PEDVORF3基因设计一对引物,优化其反应体系和退火温度,并测试其特异性和敏感性。结果显示,在退火温度55.2℃,上、

【作者】

：

阚蕊慈张斌任玉鹏岳华

【机构】

：

西南民族大学生命科学与技术学院

【出处】

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动物医学进展

【发表日期】

：

2019年5期

【关键词】

：

猪流行性腹泻病毒 ORF3基因反转录-聚合酶链反应鉴别诊断

【基金项目】

：

“十三五”国家重点研发计划项目(2016YFD0500705);西南民族大学研究生创新科研项目(CX2018SZ46)

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为了建立一种快速鉴别PEDV强毒株和弱毒株的RT-PCR方法,针对PEDVORF3基因设计一对引物,优化其反应体系和退火温度,并测试其特异性和敏感性。结果显示,在退火温度55.2℃,上、下游引物各0.5μL时PCR扩增效果最理想。特异性试验结果显示本方法对9种常见猪病病原的核酸模板均不产生扩增条带;敏感性试验显示该方法的检测下限为T-ORF3IS272拷贝/μL和T-ORF3VC14.4拷贝/μL。将本试验建立的RT-PCR法与已建立的双重RT-PCR方法进行比较,结果显示两种方法符合率为99.2%,且本

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