Adipophilin真核表达载体的构建与表达分析

来源 :中国现代医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：qdmarie

【摘要】

：

目的构建能在真核细胞中表达的adipophilin表达质粒pcDNA3．1-HA—adi。方法从培养的C57BL／6J小鼠血管平滑肌细胞提取总RNA，在PCR引物中加入HA序列，用RT—PcR及TOPO克隆技术得到HA

【作者】

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贾薇何玲田荣波袁中华

【机构】

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吉首大学医学院基础医学部,南华大学心血管病研究所动脉硬化学湖莆省重点实验室

【出处】

：

中国现代医学杂志

【发表日期】

：

2009年10期

【关键词】

：

ADIPOPHILIN 基因重组脂滴动脉粥样硬化 adipophilin gene recombination lipid droplet ather

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目的构建能在真核细胞中表达的adipophilin表达质粒pcDNA3．1-HA—adi。方法从培养的C57BL／6J小鼠血管平滑肌细胞提取总RNA，在PCR引物中加入HA序列，用RT—PcR及TOPO克隆技术得到HA—adi克隆载体，测序后，把HA—adi定向插入pcDNATM3．1／myc—His（-）-C的多克隆位点。阳离子聚合物介导转染人THP-1巨噬细胞，用RT—PCR及Western blot的方法检测目的蛋白在细胞中的表达。结果限制性内切酶酶切和DNA测序分析证实成功获得HA—adi基因片段

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