【摘 要】
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为验证细胞外基质成分纤维连接蛋白(fibronectin, Fn)对气道上皮细胞具有调控作用, 本文用硝酸还原酶法测定了原代培养的兔支气管上皮细胞(bronchial epithelial cells, BEC)
【机 构】
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中南大学湘雅医学院生理学教研室,长沙,410078
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为验证细胞外基质成分纤维连接蛋白(fibronectin, Fn)对气道上皮细胞具有调控作用, 本文用硝酸还原酶法测定了原代培养的兔支气管上皮细胞(bronchial epithelial cells, BEC)的一氧化氮(nitric oxide, NO)释放, 并测定了细胞内一氧化氮合酶(nitric oxide synthesase, NOS)活性, 观察纤维连接蛋白、精-甘-天冬氨酸肽(Arg-Gly-Asp peptide, RGD)处理的影响, 设置臭氧攻击组为阳性对照.结果: (1) 臭氧攻击2 h后, NO释放增多(P<0.01, n=7), Fn (15 μg/ml)也能增加NO释放(P<0.01), 并被钙调素抑制剂N-(6-氨基己烷)-5-氯-1-萘酚-磺酰胺(N-(6-Aminohexyl)-5-chloro-1-naphthalene-sulfonamide, W7)(10-5 mol/L)所阻断(P<0.01); (2) Fn (5～20 μg/ml)及RGD (15～60 μg/ml)均显示对NO释放量的剂量依赖性促进作用(分别为r=0.85和r=0.89); (3) Fn (15 μg/ml)明显提高BEC的NOS活性(P<0.01, n=7), 此效应也能被W7阻断(P<0.01).Fn及RGD对NOS活性的上调有量-效关系, 分别为r=0.93及r=0.90.结果提示, Fn及其特殊识别片段RGD肽与BEC整合素分子的结合, 可上调细胞的NOS活性及NO释放, 其效应发挥与钙调素途径有关.
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