【摘 要】
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目的表达口蹄疫病毒3D聚合酶,并制备兔抗3D多克隆抗体。方法采用PCR方法扩增口蹄疫病毒（FM-DV）3D聚合酶基因,经BamHⅠ和NdeⅠ双酶切后插入pET-30a（＋）原核表达载体,构建的pET-3D重
【基金项目】
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国家支撑计划项目（2006BAD06A06）资助
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目的表达口蹄疫病毒3D聚合酶,并制备兔抗3D多克隆抗体。方法采用PCR方法扩增口蹄疫病毒（FM-DV）3D聚合酶基因,经BamHⅠ和NdeⅠ双酶切后插入pET-30a（＋）原核表达载体,构建的pET-3D重组表达质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）菌株,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定目的蛋白的表达并提取包涵体,纯化目的蛋白。然后用纯化蛋白免疫新西兰大耳白兔制备多克隆抗体,以Western blot鉴定抗体特异性,并以间接ELISA方法测定其效价。结果SDS-PAGE电泳分析显示,表达的目的蛋白约为
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