单雌蓖麻ISSR-PCR反应体系的建立和优化

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以单雌蓖麻提取的基因组DNA为材料,采用单因子试验方法,分别研究了Mg2+浓度、dNTP浓度、引物浓度、丁砷DNA聚合酶以及模板DNA用量5种因素对ISSR-PCR反应的影响;建立了适合单雌蓖麻IS—SR—PCR扩增的反应体系,即在20μL反应体系中,10×PCR buffer2.5μL(Mg2+free),模板DNA20ng,2.0mml/L MgCl2,引物浓度1.0μmol/L,dNTP0.4mmol/L,Taq DNA聚合酶1.0U。
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