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目的分析两种方法制备C群脑膜炎球菌多糖CRM197蛋白结合物的主要生物学特性,并对比其热稳定性和免疫原性,选择适用于C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的制备方法。方法采用1-氰基-4-二甲氨基吡啶四氟硼酸盐（CDAP）活化C群多糖,经己二酸二酰肼（ADH）衍生后,在1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺（EDAC）的催化作用下与CRM197共价结合,获得结合物CPSCDAPAH-CRM197;将C群多糖不经活化直接通过ADH衍生后,在EDAC的催化下与CRM197共价结合,获得结合物CPSEDACAH-CRM197。对两种方法制备结合物的多糖含量、游离多糖含量、蛋白含量及多糖衍生度等生化指标进行测定,并计算多糖利用率;将结合物分别于37℃放置2周、3周,20～25℃放置4周和8周后取样,测定游离多糖含量;将两种方法制备的结合物免疫小鼠后,检测小鼠血清中C群多糖IgG抗体水平;体外杀菌试验评价结合物的功能性杀菌抗体水平。结果结合物CPSCDAPAH-CRM197的多糖衍生度较低,游离多糖含量较高,平均多糖利用率为12.2%,于37及22～25℃温度下保存稳定性较差;结合物CPSEDACAH-CRM197的多糖利用率比前者高近2倍,游离多糖含量较低,在37和22～25℃温度下保存均表现出良好的热稳定性（游离多糖含量均未超过5%）。CPSEDACAH-CRM197组小鼠血清IgG抗体水平显著高于CPSCDAPAH-CRM197组（P<0.05）,但两者诱导的杀菌抗体水平相当（P>0.05）。结论C群多糖不经活化直接与蛋白结合的方法更适用于C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的制备。