黑曲霉植酸酶基因phyA的克隆及在大肠杆菌中的表达

来源 :沈阳农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liwj
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为获得大量、高活性植酸酶以及研究和开发新型微生物生物制剂.从自行筛选的黑曲霉中提取RNA,通过反转录合成模板cDNA,根据phyA成熟肽编码序列设计出一对引物,PCR扩增phyA,对扩增片段进行了克隆,通过限制性内切酶酶切分析、DNA测序证明phyA基因克隆成功。从pBS—T-phyA克隆中获取phyA编码序列,将其与pET28a^+质粒连接,构建pET28a^+-phyA重组质粒,并在大肠杆菌中获得高效表达。本研究成功克隆phyA,该基因全长1404bp,以ATG为起始密码子,TGA为终止密码子,编码4
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