【摘 要】
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目的构建泡球蚴18(Em18)基因的原核表达质粒,获得高效表达、有生物活性的Em18重组蛋白,为包虫病诊断试剂的研制奠定基础. 方法用DNAman软件设计引物,分别在引物5′端和3′端
【基金项目】
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国家自然科学基金，新疆重点实验室基金
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目的构建泡球蚴18(Em18)基因的原核表达质粒,获得高效表达、有生物活性的Em18重组蛋白,为包虫病诊断试剂的研制奠定基础. 方法用DNAman软件设计引物,分别在引物5′端和3′端添加EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点,以pMD18-T/Em18原核表达质粒为模板,PCR扩增Em18基因片断,经酶切,克隆入原核表达载体pET-41a(+),构建原核表达质粒pET41a-Em18;转化大肠埃希菌BL21(DE3),酶切、PCR及测序鉴定其插入序列的正确性.经IPTG诱导表达rEm18-GST重组蛋白和GST重
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