甘草根cDNA文库构建与分析

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目的:构建甘草eDNA文库,为甘草功能基因的研究以及筛选、克隆与甘草次生代谢产物合成途径相关基因奠定基础。方法:以LiCI沉淀法提取根组织总RNA,置换合成法合成双链eDNA,末端补平,连接EeoRⅠ并磷酸化,以pBlueSerlptⅡ为载体并电转化感受态细胞E.coli DH10 β,测定文库的克隆数、重组率,PCR测定插入片断大小。同时,对文库进行随机测序并在GenBank中进行同源性检索和功能预测。结果:经鉴定文库的库容量为1.15×10^7,重组率为98.2%,插入片段在0.5~4.8k
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