论文部分内容阅读
目的 检测双向调节因子(AREG)在结直肠癌组织和细胞株中的表达,探讨其参与肿瘤侵袭迁移的机制.方法 应用免疫组织化学(IHC)技术检测55例结直肠癌与配对癌旁组织中AREG蛋白的表达,分析该蛋白与结直肠癌侵袭转移病理特征的关系.合成抑制内源性AREG表达的小干扰RNA(siRNA)并转染HT-29细胞;噻唑蓝(MTT)法检测肿瘤细胞的活性;应用划痕实验及Transwell小室侵袭实验检测细胞的侵袭迁移能力;实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)及Western blot检测转染前后细胞中侵袭相关基因基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、组织基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、细胞间黏附因子-1(ICAM-1)的表达.结果 结直肠癌组织中AREG的表达阳性率(81.82%)明显高于癌旁组织的阳性率(25.45%,P<0.05);结直肠癌组织中AREG的阳性表达与淋巴结转移、肝转移有关(P<0.05).AREG-siRNA有效抑制HT-29细胞中内源性AREG表达;MTT结果显示转染48 h后AREG-siRNA转染组细胞活性为0.41±0.04,明显低于非特异性siRNA转染组(Non-siRNA,0.68 ±0.03)和空白对照组(Blank control,0.71 ±0.03,P< 0.05).AREG-siRNA转染后HT-29细胞的迁移及侵袭能力与Non-siRNA组、Blank control组比较均明显降低(P<0.05).AREG-siRNA转染后HT-29细胞MMP-2、MMP-9表达明显降低,TIMP-1表达升高(P<0.05),而ICAM-1在转染前后比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 AREG基因可能通过调节部分MMP-TIMPs家族基因而促进了结直肠癌侵袭转移.