探讨细胞色素酶P450 1A1 （CYP1A1）对巨噬细胞向M2型极化的调控作用及其分子机制。
方法所有实验采用完全随机设计。①实验1：选择6～8周龄健康雄性C57BL/6J小鼠，提取原代腹腔细胞，将细胞分为磷酸盐缓冲液（PBS）对照组和白细胞介素-4（IL-4）组。IL-4组用10 mg/L的M2型巨噬细胞诱导剂IL-4刺激细胞；PBS对照组给予等量PBS。采用定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）检测IL-4刺激2、4、6 h后细胞内M2型极化标志分子精氨酸酶-1（Arg-1）、几丁质酶3样蛋白1（YM1）及CYP1A1的mRNA表达；采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测IL-4刺激6、12、24 h后细胞内酪氨酸蛋白激酶1/信号转导和转录激活因子6（JAK1/STAT6）通路磷酸化及CYP1A1、Arg-1蛋白表达。②实验2：体外培养CYP1A1高表达的RAW264.7细胞（CYP1A1/RAW）及其阴性对照细胞（NC/RAW），取对数生长期细胞分为PBS对照组和IL-4组，处理方法同实验1。采用Western Blot法检测IL-4刺激1 h、2 h后不同细胞内JAK1/STAT6及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）通路磷酸化；同时采用RT-qPCR及Western Blot法检测IL-4刺激2 h、4 h后细胞内通路下游产物Arg-1的mRNA和蛋白表达。
结果①实验1：经IL-4刺激2 h后，小鼠原代腹腔巨噬细胞内Arg-1、YM1的mRNA表达即较PBS对照组明显增加〔Arg-1 mRNA（2-ΔΔCt）：1.75±0.82比1.00±0.21，YM1 mRNA（2-ΔΔCt）：2.58±0.53比1.00±0.20，均P<0.05〕，说明IL-4诱导巨噬细胞向M2型极化成功；同时，极化的小鼠原代腹腔巨噬细胞内CYP1A1的mRNA表达也较PBS对照组明显增加，4 h达峰值〔CYP1A1 mRNA（2-ΔΔCt）：2.25±0.69比1.00±0.17，P<0.01〕，说明巨噬细胞向M2型极化时CYP1A1表达增强。IL-4刺激6 h后，小鼠原代腹腔巨噬细胞内磷酸化JAK1（p-JAK1）、磷酸化STAT6（p-STAT6）、Arg-1及CYP1A1的蛋白表达即较PBS对照组明显增强，以12 h更为显著，之后逐渐减弱，说明CYP1A1高表达时M2型巨噬细胞内JAK1/STAT6通路磷酸化增强，通路被激活。②实验2：经IL-4刺激2 h后，CYP1A1/RAW细胞内Arg-1 mRNA表达即较NC/RAW细胞明显增加（2-ΔΔCt：3.02±0.60比1.47±0.43，P<0.05），蛋白表达也较NC/RAW细胞明显增强，以4 h最为显著，说明CYP1A1可促进巨噬细胞向M2型极化。IL-4刺激2 h后，两种细胞内p-JAK1、p-JAK3蛋白表达均较PBS对照组明显增强，但CYP1A1/RAW细胞内p-STAT6的增强幅度较NC/RAW细胞更加明显，说明CYP1A1通过促进JAK1/STAT6通路磷酸化来促进巨噬细胞极化；同时，CYP1A1/RAW细胞内PI3K/Akt通路下游分子Akt蛋白表达较NC/RAW细胞明显减弱，说明CYP1A1不通过该通路促进巨噬细胞极化。
结论CYP1A1可促进巨噬细胞向M2型极化，其机制与促进JAK1/STAT6通路磷酸化有关。