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目的：定量检测肠道病毒71型（EV71）临床标本中病毒拷贝数,评价3种商业化Taq Man探针荧光定量PCR方法。方法：将VP1全序连接到克隆质粒p MAL-c2X上,纯化的质粒作为标准品。选取河南开封手足口病监测试点的105份手足口病患儿粪便标本,分别应用bio Perfectus Technologies（方法 A）、KINGHAWK（方法 B）和Beijing ABT（方法 C）公司的荧光定量PCR方法进行检测,比较EV71阳性检出率和定量分析结果的差异,分析3种方法的一致性。结果：成功构建重组质粒