【摘 要】
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目的 评价重组细粒棘球蚴AgB8/3亚基检测囊型包虫病价值.方法 从新疆源细粒棘球蚴原头节中提取总RNA,通过RT-PCR扩增目的基因片段并克隆入pGEX-3X表达载体,重组质粒转化大肠
【机 构】
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中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所,卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室,世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心,上海200025;新疆克孜勒苏柯尔克孜自治州地方病防治研究所,阿图什,845
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目的 评价重组细粒棘球蚴AgB8/3亚基检测囊型包虫病价值.方法 从新疆源细粒棘球蚴原头节中提取总RNA,通过RT-PCR扩增目的基因片段并克隆入pGEX-3X表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21细胞,IPTG诱导表达,用亲和层析法纯化重组蛋白,用ELISA方法评价其诊断价值并与本课题组制备的重组AgB8/1和AgB8/2进行比较.结果 酶切鉴定及测序分析表明,成功构建细粒棘球蚴pGEX-3X-AgB8/3重组质粒,并在原核细胞用IPTG成功诱导目的蛋白表达.rAgB8/3检测囊型包虫病患者血清的敏感度为55.9％(66/118)；检测泡型包虫病患者血清阳性率为44.12％(15/34)；59份其它寄生虫病患者血清中除3份囊尾蚴病人血清阳性外,其他均为阴性；50份健康者血清全部为阴性,总特异度为87.4％(125/143).rAgB8/3检测的敏感度与rAgB8/1相当(P＞0.05)而低于rAgB8/2 (P＜0.05)；rAgB8/3检测的特异度与rAgB8/1和rAgB8/2均无统计学差异(P＞0.05).结论 成功构建新疆源细粒棘球蚴pGEX-3X-AgB8/3重组质粒并在原核细胞表达,rAgB8/3检测囊型包虫病结果与rAgB8/1无统计学差异.
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