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目的
评价氢对烧伤小鼠肺损伤炎症反应时自噬的影响。
方法清洁级健康雄性ICR小鼠96只,6周龄,体重20~25 g,采用随机数字表法分为4组(n=24):假伤组(SH组)、氢气组(H2组)、烧伤组(B组)和烧伤+氢气组(B+H2组)。B组和B+H2组小鼠背部按照40%全身体表面积Ⅲ度烫伤标准制备烧伤模型,SH组和H2组小鼠仅背部脱毛,用烫头以皮温接触。于烫伤后1和6 h时,H2组和B+H2组分别吸入2%氢气1 h。于烫伤后24 h时处死小鼠后取肺组织,称肺湿重,烘干后称重,计算肺湿干重比;采用Western blot法检测自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达,计算LC3-Ⅱ与LC3-Ⅰ表达比值(LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ),采用髓过氧化物酶(MPO)试剂盒检测MPO活性,ELISA法检测IL-6和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)含量;收集肺泡灌洗液,采用ELISA法检测IL-6和HMGB1浓度,计数中性粒细胞。
结果与SH组比较,烫伤后24 h时B组和B+H2组肺湿干重比、肺组织LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、MPO、IL-6和HMGB1水平、肺泡灌洗液IL-6和HMGB1浓度、中性粒细胞计数均升高(P<0.05);与B组比较,烫伤后24 h时B+H2组肺湿干重比、MPO、IL-6和HMGB1水平、肺泡灌洗液IL-6和HMGB1浓度、中性粒细胞计数均降低,肺组织LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ降低(P<0.05)。
结论氢可通过抑制炎症反应减轻烧伤小鼠肺损伤,其机制与增强自噬有关。