家蝇幼虫抗菌肽天蚕素基因的克隆及其在大肠杆菌中融合表达

来源 :中国人兽共患病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yjc0208

【摘要】

：

目的从家蝇三龄幼虫中提取总RNA，先利用RT—PCR扩增编码天蚕素Cecropin的cDNA序列，克隆入T载体pUCm-T并测定其序列。然后以pUCm-T／Cecropin为模板，通过PCR方法扩增Cecropin成熟肽

【作者】

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徐建华朱家勇金小宝许琴英刘雷山马艳王艳

【机构】

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广州中医药大学第二附属医院（广东省中医院）检验科,广东药学院基础医学院,广东医学院病原生物学教研室

【出处】

：

中国人兽共患病学报

【发表日期】

：

2007年4期

【关键词】

：

家蝇天蚕素抗菌肽基因克隆融合表达 Musca domestica cecropin antibacterial peptide gene cloning

【基金项目】

：

Supported by grant of State Natural Science Foundation （30671832）, Key Science and Technology Program of Guangdong Province （2003B31602）, and Key Science and Technology Pro- gram of Guangzhou （2005Z3-

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目的从家蝇三龄幼虫中提取总RNA，先利用RT—PCR扩增编码天蚕素Cecropin的cDNA序列，克隆入T载体pUCm-T并测定其序列。然后以pUCm-T／Cecropin为模板，通过PCR方法扩增Cecropin成熟肽cDNA序列，并将该序列的N-瘤大肠杆菌稀有密码子GGA点突变为GGC，C-端终止密码子TAA前加进一个天冬酰胺（Asn）密码子AAC．命名为mCeccopin。mCecropin基因序列克隆至融合表达载体pGEX-4T-1中。酶切分析和测序鉴定后，将阳性重组子质粒转入不同的太肠杆菌宿主细

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