检测弓形虫PCR-ELISA方法的建立

来源 :中国病原生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liuweiljfs
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目的 建立检测弓形虫DNA的快速、敏感、特异、稳定的PCR-ELISA方法。方法 将生物素标记的PCR产物与地高辛标记的特异性探针杂交。通过酶免疫显色反应测出A值,判断弓形虫感染情况。优化反应条件,测定方法的敏感性。并与琼脂糖凝胶电泳结果比较。以人、小鼠、疟原虫、旋毛虫等DNA为模板在同样条件下进行测试,以确定该方法的特异性。结果 本实验的最佳杂交时间为30min,最佳探针浓度为3pmol/ml。该方法的检测阈值为20fg弓形虫DNA,其灵敏度是电泳法的10倍,并且与人、小鼠、疟原虫、旋毛虫等DNA均无交
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