盐生杜氏藻（Dunaliella salina）cDNA文库构建及功能基因筛选

来源 :热带亚热带植物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jakieli

【摘要】

：

采用Qiagen公司的植物总RNA提取技术、Clonmch公司的Creator^-TM技术平台以及SMART^TM技术进行cDNA文库构建。从杜氏藻中提取出了高质量的总RNA，通过PowerScript反转录酶反转

【作者】

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李钢刘敏蒋彦乔代蓉曹毅

【机构】

：

四川大学生命科学学院

【出处】

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热带亚热带植物学报

【发表日期】

：

2004年1期

【关键词】

：

盐生杜氏藻 CDNA文库功能基因组学 Dunaliella salina cDNA library Functional gene

【基金项目】

：

SupportedbyNationalNaturalScienceFoundation(39780018),NationalTransgenicProject(J00-A-008-09).

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采用Qiagen公司的植物总RNA提取技术、Clonmch公司的Creator^-TM技术平台以及SMART^TM技术进行cDNA文库构建。从杜氏藻中提取出了高质量的总RNA，通过PowerScript反转录酶反转录杜氏藻的总RNA，采用LD-PCR、酶处理等方法对cDNA进行等比例扩增、纯化，同时使用CHROMA SPIN-400柱子将cDNA分段化，最后将长片段连入pDNR-LIB质粒，1．5kV，25μF电转化大肠杆菌JM109，得到含1．5×10^6个克隆子的原始文库，滴度为1．5

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